<!DOCTYPE HTML PUBLIC "-//W3C//DTD HTML 4.0 Transitional//EN">
<HTML xmlns="http://www.w3.org/TR/REC-html40" xmlns:v = 
"urn:schemas-microsoft-com:vml" xmlns:o = 
"urn:schemas-microsoft-com:office:office" xmlns:w = 
"urn:schemas-microsoft-com:office:word" xmlns:m = 
"http://schemas.microsoft.com/office/2004/12/omml"><HEAD>
<META content="text/html; charset=us-ascii" http-equiv=Content-Type>
<META name=GENERATOR content="MSHTML 9.00.8112.16443">
<STYLE>@font-face {
        font-family: Calibri;
}
@page WordSection1 {size: 8.5in 11.0in; margin: 1.0in 1.0in 1.0in 1.0in; }
P.MsoNormal {
        MARGIN: 0in 0in 0pt; FONT-FAMILY: "Calibri","sans-serif"; FONT-SIZE: 11pt
}
LI.MsoNormal {
        MARGIN: 0in 0in 0pt; FONT-FAMILY: "Calibri","sans-serif"; FONT-SIZE: 11pt
}
DIV.MsoNormal {
        MARGIN: 0in 0in 0pt; FONT-FAMILY: "Calibri","sans-serif"; FONT-SIZE: 11pt
}
A:link {
        COLOR: blue; TEXT-DECORATION: underline; mso-style-priority: 99
}
SPAN.MsoHyperlink {
        COLOR: blue; TEXT-DECORATION: underline; mso-style-priority: 99
}
A:visited {
        COLOR: purple; TEXT-DECORATION: underline; mso-style-priority: 99
}
SPAN.MsoHyperlinkFollowed {
        COLOR: purple; TEXT-DECORATION: underline; mso-style-priority: 99
}
SPAN.EmailStyle17 {
        FONT-FAMILY: "Calibri","sans-serif"; COLOR: windowtext; mso-style-type: personal-compose
}
.MsoChpDefault {
        mso-style-type: export-only
}
DIV.WordSection1 {
        page: WordSection1
}
</STYLE>
<!--[if gte mso 9]><xml>
<o:shapedefaults v:ext="edit" spidmax="1026" />
</xml><![endif]--><!--[if gte mso 9]><xml>
<o:shapelayout v:ext="edit">
<o:idmap v:ext="edit" data="1" />
</o:shapelayout></xml><![endif]--></HEAD>
<BODY lang=EN-US vLink=purple link=blue>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>Debby,</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>Not sure any of these explain negative readings, but here are 
some things to consider:</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>(1) Did you remember to rotate the lever on the monochromator 
to filter out the stray light below 400 nm? Either way, 
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>you may want to take a scan in intensity mode to see whether 
you really have enough light going through to make a reasonable measurement. The 
lamp outputs very little light in the visible compared to the 
UV.</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012>(2) Could the wavelength 
calibration be way off in the visible region?</SPAN></DIV></FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>(3) Is it possible your particles sediment so fast they had 
simply already pelleted by the time you could take a 
measurement?</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=339131919-13062012><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>John</FONT></SPAN></DIV><BR>
<DIV dir=ltr lang=en-us class=OutlookMessageHeader align=left>
<HR tabIndex=-1>
<FONT size=2 face=Tahoma><B>From:</B> rasmb-bounces@rasmb.bbri.org 
[mailto:rasmb-bounces@rasmb.bbri.org] <B>On Behalf Of </B>Deborah 
Pheasant<BR><B>Sent:</B> Wednesday, June 13, 2012 12:10 PM<BR><B>To:</B> 
rasmb@server1.bbri.org<BR><B>Subject:</B> [RASMB] Nanoparticle absorbance 
question<BR></FONT><BR></DIV>
<DIV></DIV>
<DIV class=WordSection1>
<P class=MsoNormal>Hi all,<o:p></o:p></P>
<P class=MsoNormal>We had a suspension of nanoparticles (metal oxides) in 
culture medium with FBS proteins and it measured 0.5 AU at 530 nm in a UV/VIS 
spec.  When we put it into SV centerpieces, it read that it had an A530 of 
about -0.1 or -0.2.  We are perplexed as to why this should be.  Have 
you had similar experiences or do you have an idea about what might be going 
on?<o:p></o:p></P>
<P class=MsoNormal>Thanks very much,<o:p></o:p></P>
<P class=MsoNormal>Debby Pheasant<o:p></o:p></P></DIV></BODY></HTML>