<!DOCTYPE HTML PUBLIC "-//W3C//DTD HTML 4.0 Transitional//EN">
<HTML><HEAD>
<META content="text/html; charset=us-ascii" http-equiv=Content-Type>
<META name=GENERATOR content="MSHTML 8.00.6001.19019"></HEAD>
<BODY>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>Sumit,</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>Yes you could manually calculate the weight average of light 
and heavy chain, but remember it is only the total AA composition that matters, 
and for vbar purposes there is no distinction whatever between intra- versus 
inter-chain disulfides. Thus the best thing to do is to simply merge 
together the 2 sequences (using Notepad for example) and treat the entire 
antibody as a covalent dimer of the single fused chain (the order of light 
versus heavy is irrelevant). Once SEDNTERP sums the combined sequence, tell it 
yes convert all the cysteines to disulfides, and then click the 'make an 
oligomer' check box so it converts it to a dimer. Presto!</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>That will give you the right vbar for the polypeptide portion, 
but does not deal with the carbohydrates which presumably are 
present.</FONT></SPAN></DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV dir=ltr align=left><SPAN class=191492121-22032011><FONT color=#0000ff 
size=2 face=Arial>John</FONT></SPAN></DIV><BR>
<DIV dir=ltr lang=en-us class=OutlookMessageHeader align=left>
<HR tabIndex=-1>
<FONT size=2 face=Tahoma><B>From:</B> rasmb-bounces@rasmb.bbri.org 
[mailto:rasmb-bounces@rasmb.bbri.org] <B>On Behalf Of </B>sumit 
goswami<BR><B>Sent:</B> Tuesday, March 22, 2011 12:22 PM<BR><B>To:</B> 
rasmb@server1.bbri.org<BR><B>Subject:</B> [RASMB] V-bar calculation for 
mAb<BR></FONT><BR></DIV>
<DIV></DIV>
<DIV>Hello all,</DIV>
<DIV>             I 
was trying to calculate v-bar of a mAb using SEDNTERP. I have the sequence 
of heavy chain (HC) and light chain (LC) seperately as expected. It 
seems to be little complicated. Because there are HC-HC and LC-LC disulfide 
linkages too.The question is how do I deal with that? Should I calculate the 
v-bar of Fab and Fc seperately and then calculate an weight avergae of them? 
</DIV>
<DIV> </DIV>
<DIV>With regards,</DIV>
<DIV>Sumit</DIV></BODY></HTML>