<!DOCTYPE HTML PUBLIC "-//W3C//DTD HTML 4.0 Transitional//EN">
<HTML><HEAD>
<META HTTP-EQUIV="Content-Type" CONTENT="text/html; charset=iso-8859-1">


<META content="MSHTML 6.00.2800.1597" name=GENERATOR></HEAD>
<BODY>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><SPAN class=591374208-03032008><FONT 
face=Arial size=2>Dear AUC users,</FONT></SPAN></SPAN></DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial size=2><SPAN 
class=591374208-03032008>I have a problem in the fitting of some data and I 
would like to have your opinion.</SPAN></FONT></SPAN></DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial size=2><SPAN 
class=591374208-03032008></SPAN></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial><FONT size=2>I want to 
control the sedimentation of<SPAN class=591374208-03032008> </SPAN><SPAN 
class=591374208-03032008>a </SPAN>protein in order to define the state of 
oligomerization. <SPAN class=591374208-03032008>It is published as forming 
an <SPAN class=591374208-03032008> h</SPAN>e<SPAN 
class=591374208-03032008>x</SPAN>americ homo oligomer.<SPAN 
class=591374208-03032008> </SPAN>From the crystal structure, i</SPAN>t 
is a wheel like structure of 160<SPAN 
class=591374208-03032008> angstrom</SPAN><SPAN 
class=591374208-03032008> </SPAN> in diameter, with a central role of 
15<SPAN class=591374208-03032008> </SPAN>angstrom in diameter.<SPAN 
class=591374208-03032008> </SPAN><SPAN class=591374208-03032008>The 
thickness is 20-40 angstrom. How can I expect it to sediment? How can I improve 
my parameters or model in order to improve the 
fitting?</SPAN></FONT></FONT></SPAN></DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial size=2><SPAN 
class=591374208-03032008></SPAN></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial size=2>The protein is 
50KDa <SPAN class=591374208-03032008> but in </SPAN>gel 
filtration it cames out as <SPAN class=591374208-03032008> hexamer 
(300 KDa)</SPAN>.<SPAN class=591374208-03032008> </SPAN>In my sedimentation 
experiment I see <SPAN class=591374208-03032008>one </SPAN>peak 
of <SPAN class=591374208-03032008> 6.23S which corresponds to 
</SPAN>140KDa. <SPAN class=591374208-03032008><FONT color=#0000ff>Fitting 
of the sedimentation data was done with SedFit. </FONT></SPAN><SPAN 
class=591374208-03032008>D</SPAN>o you think I can say that it is a trimer? I 
would expect it as an <SPAN 
class=591374208-03032008>h</SPAN>examer.</FONT></SPAN></DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial 
size=2></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial><FONT size=2>I 
hope someo<FONT color=#0000ff><SPAN class=591374208-03032008>ne</SPAN><SPAN 
class=591374208-03032008> can</SPAN></FONT> help me<SPAN 
class=591374208-03032008><FONT 
color=#0000ff>. </FONT></SPAN></FONT></FONT></SPAN></DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial><FONT color=#0000ff 
size=2><SPAN class=591374208-03032008></SPAN></FONT></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial size=2>the conditions are 
:</FONT></SPAN><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial 
size=2> </FONT></DIV>
<DIV>
<DIV class=O v:shape="_x0000_s2050">
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><FONT face=Arial size=2>buffer 20mM Tris pH7, 150mM NaCl, 
1mM DTT, 5%gly </FONT></SPAN></DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><FONT face=Arial size=2>Vbar 0.7397 </FONT></SPAN></DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><FONT face=Arial size=2>Viscosity 1.02530 
</FONT></SPAN></DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><FONT face=Arial size=2>Density 0.01183 
</FONT></SPAN></DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><FONT face=Arial size=2></FONT></SPAN> </DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial 
size=2>Thanks a lot</FONT></SPAN></SPAN></DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><SPAN class=726354713-28022008><FONT face=Arial><FONT 
size=2>Marina<SPAN 
class=591374208-03032008> </SPAN></FONT></FONT></SPAN></SPAN></DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><SPAN class=726354713-28022008><FONT size=2><SPAN 
class=591374208-03032008></SPAN></FONT></SPAN></SPAN> </DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><SPAN class=726354713-28022008><FONT size=2><SPAN 
class=591374208-03032008></SPAN></FONT></SPAN></SPAN> </DIV>
<DIV 
style="mso-line-spacing: '100 50 0'; mso-char-wrap: 1; mso-kinsoku-overflow: 1"><SPAN 
style="FONT-SIZE: 58%"><SPAN class=726354713-28022008><FONT size=2><SPAN 
class=591374208-03032008> </SPAN></FONT></SPAN></SPAN></DIV>
<DIV style="mso-line-spacing: '100 50 0'"><SPAN 
style="mso-special-format: lastCR"><FONT face=Arial 
size=2></FONT></SPAN></DIV></DIV></SPAN></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>MARINA FASOLINI</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Structural Chemistry </FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2><A href="http://www.nervianoms.com/">Nerviano 
Medical Sciences</A></FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Viale Pasteur 10</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>20014 Nerviano - </FONT><FONT face=Arial 
size=2>Milano</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2><A 
href="mailto:marina.fasolini@nervianoms.com">marina.fasolini@nervianoms.com</A></FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Tel. +390331581462</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Fax. +390331581360</FONT></DIV>
<DIV> </DIV></BODY></HTML>