<?xml  version="1.0" ?><html>
<head>
<title></title>
</head>
<body>
<div align="left"><font face="Arial"><span style="font-size:10pt">Hi,</span></font></div>
<div align="left"><font face="Arial"><span style="font-size:10pt">We had observed an unexpected strong shift in pH after addition of TCEP.</span></font></div>
<div align="left"><font face="Arial"><span style="font-size:10pt">Of course this influence depends on buffer and the amount of TCEP. 
Therefore it needs to be controlled.</span></font></div>
<div align="left"><font face="Arial"><span style="font-size:10pt">If I had enough protein and time I would first do a SV-run at 280nm (DTT is 
not a problem at 280nm) one with DTT, one with TCEP and one without 
both. Buffers should be degased.</span></font></div>
<div align="left"><font face="Arial"><span style="font-size:10pt">Norbert</span></font></div>
<div align="left"></div>
</body>
</html>